1、本部分規(guī)定了蔬菜和水果中α-666、β-666、δ-666、o，p'-DDE、p，p'-DDE、o，p'-DDD、p，p'-DDD、o，p'-DDT、p，p'-DDT、異菌脲、五氯硝基苯、林丹、乙烯菌核利、三氯殺螨醇、三氟氯氰菊酯、氯硝胺、百菌清、三唑酮、甲氰菊酯、氯菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等22種有機(jī)氯類、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥多殘留氣相色譜檢測方法。
式中：
本部分適用于蔬菜和水果中上述22種農(nóng)藥殘留量的檢測。
2、原理
樣品中有機(jī)氯類、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥用乙腈提取，提取液采用固相萃取技術(shù)分離、凈化、濃縮后，用雙塔自動進(jìn)樣器同時將樣品注人氣相色譜的兩個進(jìn)樣口，組分經(jīng)不同極性的兩根毛細(xì)管柱分離，電子捕獲檢測器(ECD)檢測。外標(biāo)法定性、定量。
3試劑與材料
方法所用試劑，凡未指明規(guī)格者，均為分析純；水為蒸餾水。
3、試劑與材料
方法所用試劑，凡未指明規(guī)格者，均為分析純；水為蒸餾水。
3.1 乙腈。
3.2 丙酮，重蒸。
3.3 己烷，重蒸。
3.4 氯化鈉，140℃烘烤4h。
3.5 固相萃取柱，弗羅里矽柱(Florisil®)，容積6mL，填充物1 000mg。
3.6 鋁箔。
3.7農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，見表1。
表1 22種有機(jī)氯農(nóng)藥及擬除蟲菊酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品
|
序號
|
中文名
|
英文名
|
純度
|
溶劑
|
組別
|
|
1
|
α-666
|
α-BHC
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅰ
|
|
2
|
氯硝胺
|
dicloran
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅲ
|
|
3
|
β-666
|
β-BHC
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅰ
|
|
4
|
林丹
|
lindane
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅱ
|
|
5
|
δ-666
|
δ-EHC
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅰ
|
|
6
|
五氯硝基苯
|
pentachlOtonitobenzene
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅱ
|
|
7
|
百菌清
|
chlorothalonil
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅲ
|
|
8
|
乙烯菌核利
|
vinclozolin
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅱ
|
|
|
毒死蜱
|
chlorpyrilos
|
≥96％
|
正己烷
|
|
|
9
|
三氯殺螨醇
|
dicofol
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅱ
|
|
10
|
三唑酮
|
triadimefon
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅲ
|
|
11
|
o，p'-DDE
|
o，p'-DDE
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅰ
|
|
12
|
p，p'-DDE
|
p，p'-DDE
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅰ
|
|
13
|
o，p'-DDD
|
o，p'-DDD
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅰ
|
|
14
|
p，p'-DDD
|
p，p'-DDD
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅰ
|
|
15
|
o，p'-DDT
|
o，p'-DDT
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅱ
|
|
16
|
p，p'-DDT
|
p，p'-DDT
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅰ
|
|
17
|
異菌脲
|
iprodione
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅰ
|
|
18
|
甲氰菊酯
|
fenpropathrin
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅲ
|
|
19
|
三氟氯氰菊酯
|
lambda-cyhalothrin
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅱ
|
|
20
|
氯菊酯
|
permethrin
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅲ
|
|
21
|
氰戊菊酯
|
fenvalerate
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅲ
|
|
22
|
溴氰菊酯
|
deltamethrin
|
≥96％
|
正己烷
|
Ⅲ
|
3.8 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
單個農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取一定量農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，用正己烷稀釋，逐一配制成22種農(nóng)藥1 000mg/L單一農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲備液，貯存在－18℃以下冰箱中。使用時根據(jù)各農(nóng)藥在對應(yīng)檢測器上的響應(yīng)值，吸取適量的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，用正己烷稀釋配制成所需的標(biāo)準(zhǔn)Ⅰ作液。
農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：將22種農(nóng)藥分為3組，按照表1中組別，根據(jù)務(wù)農(nóng)藥在儀器上的響應(yīng)值，逐一吸取一定體積的同組別的單個農(nóng)藥儲備液分別注入同一容量瓶中，用正己烷稀釋至刻度，采用同樣方法配制成3組農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液。使用前用正己烷稀釋成所需濃度的標(biāo)準(zhǔn)Ⅰ作液。
4、儀器設(shè)備
4.1 分析實驗室常用儀器設(shè)備。
4.2食品加Ⅰ器。
4.3旋渦混合器。
4.4 勻漿機(jī)。
4.5 氮吹儀。
4.6 氣相色譜儀，配有雙電子捕獲檢測器(ECD)，雙塔自動進(jìn)樣器，雙毛細(xì)管進(jìn)樣口。
5、測定步驟
5.1 試料制備
同第一部分“方法一”。
5.2 提取
同第一部分“方法一”。
5.3 凈化
從l00mL具塞量筒中吸取10.00mL乙腈溶液，放人150mL燒杯中，將燒杯放在水80℃浴鍋上加熱，杯內(nèi)緩緩?fù)ㄈ说獨饣蚩諝饬?，蒸發(fā)近干，加入2.0mL正己烷，蓋上鋁箔待檢測。
將弗羅里矽柱依次用5.0mL丙酮十正己炳(10十90)、5.0mL正己烷預(yù)淋條件化，當(dāng)溶劑液面到達(dá)柱吸附層表面時，立即倒人樣品溶液，用15mL刻度離心管接收洗脫液，用5mL丙酮十正己烷(10十90)涮洗燒杯后淋洗弗羅里矽柱，并重復(fù)一次。將盛有淋洗液的離心管置于氮吹儀上，在水浴溫度50℃條件下，氮吹蒸發(fā)至小于5mL，用正己烷準(zhǔn)確定容至5.0mL，在旋渦混合器上混勻，分別移人兩個2mL自動進(jìn)樣器樣品瓶中，待測。
5.4 測定
5.4.1 色譜參考條件
5.4.1.1 色譜柱
預(yù)柱，1.00m，0.25mm內(nèi)徑、脫活石英毛細(xì)管柱。
分析柱采用兩根色譜柱，分別為：
分析柱A：100％聚甲基硅氧烷(DB-1或HP-1)柱，30m×0.25mm×0.25um。
分析柱B：50％聚苯基甲基硅氧烷(DB-17或HP－50＋)柱，30m×0.25mm×0.25um。
5.4.1.2 溫度
進(jìn)樣口溫度，200℃。
檢測器溫度，320℃。
柱溫，150℃(保持2min)6℃/min 270℃(保持8min，測定溴氯菊酯保持23min)。
5.4.1.3氣體及流量
載氣：氮氣，純度≥99.999％，流速為lmL/min。
5.4.1.4 進(jìn)樣方式
分流進(jìn)樣，分流比1十10。樣品一式兩份，由雙塔自動進(jìn)樣器同時進(jìn)樣。
5.4.2 色譜分析
由自動進(jìn)樣器吸取1.0μL標(biāo)準(zhǔn)混合溶液(或凈化后的樣品溶液)注入色譜儀中，以雙柱保留時間定性，以分析柱A獲得的樣品溶液峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積比較定量。
6、結(jié)果
6.1 定性
雙柱測得的樣品中未知組分的保留時間(RT)分分別與標(biāo)樣在同一色譜柱上的保留時間(RT)相比較，如果樣品中某組分的兩組保留時間與標(biāo)準(zhǔn)中某—農(nóng)藥的兩組保留時間相差都在±0.5min內(nèi)的可認(rèn)定為該農(nóng)藥。
6.2 計算
樣品中被測農(nóng)藥殘留量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω計，數(shù)值以毫克每千克(mg/kg)表示，按公式(1)計算。
式中：
ψ—標(biāo)準(zhǔn)溶液中農(nóng)藥的含量，單位為毫克/升(mg/L)；
A—樣品中被測農(nóng)藥的峰面積；
As—農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液中被測農(nóng)藥的峰面積；
V1—提取溶劑總體積；
V2—吸取出用于檢測的提取溶液的體積；
V3—樣品定容體積；
m—樣品的質(zhì)量。
計算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。
6.3 精密度
將22種有機(jī)氯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液在0.01mg/L～0.10mg/L、0.10mg/L～1.00mg/L和0.50mg/L～5.00mg/L三個水平添加到蔬菜和水果樣品中進(jìn)行方法的精密度試驗，方法的添加回收率在70％～120％之間，變異系數(shù)小于20％。
7、色譜圖
見圖。各農(nóng)藥色譜峰保留時間參考值見附錄A。
附錄A（資料性）
|
序號
|
中文名
|
英文名
|
相對保留時間
|
最低檢出限MDLmg/kg
|
組別
|
||
|
A-RRT(DB-17，ECD)
|
B-RRT(DB-1，ECD)
|
A(DB-17)
|
B(DB-1)
|
||||
|
1
|
α－666
|
α-BHC
|
0．72
|
0．70
|
0．0006
|
0．0008
|
Ⅰ
|
|
2
|
氯硝胺
|
dicloran
|
0．78
|
0．7l
|
0．0008
|
0．0010
|
Ⅲ
|
|
3
|
μ666
|
μ-BHC
|
0．82
|
0．73
|
0．0001
|
0．0015
|
Ⅰ
|
|
4
|
林丹
|
lindane
|
0．80
|
0．77
|
0．0008
|
0．0010
|
Ⅱ
|
|
5
|
δ-666
|
δ-BHC
|
0．90
|
0．78
|
0．0008
|
0．0010
|
Ⅰ
|
|
6
|
五氯硝基苯
|
pentachloronitrobenzene
|
0．77
|
0．79
|
0．0006
|
0．0008
|
Ⅱ
|
|
7
|
百菌清
|
chlorothalonil
|
0．88
|
0．81
|
0．0009
|
0．0011
|
Ⅲ
|
|
8
|
乙烯菌核利
|
vinclozolin
|
0．88
|
0．94
|
0．0020
|
0．0025
|
Ⅱ
|
|
9
|
毒死蜱
|
dicofol
|
1．03
|
1．05
|
0．0250
|
0．0170
|
Ⅱ
|
|
10
|
三氯殺螨醇
|
triadimefon
|
0．99
|
1．07
|
0．0020
|
0．0033
|
Ⅲ
|
|
11
|
三唑酮
|
p，p，—DDE
|
1．13
|
1．21
|
0．0008
|
0．0010
|
Ⅰ
|
|
12
|
O，p，-DDE
|
o，p，—DDE
|
1．18
|
1．29
|
0．0006
|
0．0007
|
Ⅰ
|
|
13
|
p，p，-DDE
|
O，p’—DDD
|
1．23
|
1．30
|
0．0010
|
0．0014
|
Ⅰ
|
|
14
|
p，p，-DDD
|
O，p’—DDD
|
1．29
|
1．37
|
0．0007
|
0．0010
|
Ⅰ
|
|
15
|
O，p，-DDT
|
O，p’—DDT
|
1．29
|
1．40
|
0．0025
|
0．0020
|
Ⅱ
|
|
16
|
p，p’—DDT
|
p，p’—DDT
|
1．35
|
1．47
|
0．0010
|
0．0033
|
Ⅰ
|
|
17
|
異菌脲
|
iprodione
|
1．44
|
1．56
|
0．0100
|
0．0110
|
Ⅰ
|
|
18
|
甲氰菊酯
|
fenpropathrin
|
1．45
|
1．6l
|
0．0040
|
0．0067
|
Ⅲ
|
|
19
|
三氟氯氰菊酯
|
lambda-cyhlothrin
|
1．50
|
1．73
|
0．0026
|
0．0030
|
Ⅱ
|
|
20
|
頃式—氯菊酯
|
permethrin-cis
|
1．72
|
1．82
|
0．012
|
0．0130
|
Ⅲ
|
|
21
|
反式—氯菊酯
|
permethrin-trans
|
1．74
|
1．84
|
0．0200
|
0．0100
|
Ⅲ
|
|
22
|
順式—氰戊菊酯
|
fenvalerate-cis
|
2．32
|
2．16
|
0．0100
|
0．0080
|
Ⅲ
|
|
23
|
反式—氰戊菊酯
|
fenvalerate-trans
|
2．24
|
2．12
|
0．0200
|
0．0200
|
Ⅲ
|
|
24
|
順式—溴氰菊酯
|
deltamethrin-cis
|
2．56
|
2．23
|
0．0170
|
0．0600
|
Ⅲ
|
|
25
|
反式—溴氰菊酯
|
deltamethrin-trans
|
2．66
|
2．29
|
0．0150
|
0．0560
|
Ⅲ
|
